超净工作台在沉降菌测试（TestMeasure)中的应用
目的：建立洁净室（区）中沉降菌的测试标准操作规程，保证药品在规定洁净级别的区域内进行生产。
净化工作台用途：广泛适用于医药卫生、生物制药、食品、医学科学实验、光学、电子、无菌室实验、无菌微生物检验、植物组培接种等需要局部洁净无菌工作环境的科研和生产部门。也可连接成装配生产线具有低噪声、可移动性等优点。
范围(fàn wéi)：适用于洁净室（区）的沉降菌的测试。
职责：质量管理部、QA检测(检查并测试)员
内容：
1、测试方法
本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件(tiáo jiàn)下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定(assessment)洁净室(区)的洁净度。
2、仪器设备、设备、培养基
2.1培养皿：Φ90mm×15mm 培养皿
2.2培养基：营养琼脂培养基
2.3生化培养箱：必须定期对生化培养箱进行校验。
2.4自动台式灭菌器：使用时应严格按照仪器说明书操作。
3、测试条件
3.1温度和相对湿度：洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应，温度控制在18℃～26℃，相对湿度控制在45%～65%为宜。
3.2压差：空气洁净度不同的洁净室（区）之间压差应≥10Pa。
4、测试状态：动态测试和静态测试。静态测试时，室内测试人员(personnel)不得多于2人；动态测试时，现场人员数按《洁净区人员控制管理制度(institution)》中规定执行，记录中注明现场人员数量及测试点位置。
5、测试时间：对单向流，测试应在净化空气调节系统运行不少于10分钟后开始；对非单向流，测试应在净化空气调节系统运行不少于30分钟后开始。
6、采样点数量及布置
6.1**少采样点数目
房间面积（m）
洁净度级别
100
10000
100000
＜10
2―3
2
2
≥10―＜20
4
2
2
≥20―＜40
8
2
2
≥40―＜100
16
4
2
≥100―＜200
40
10
3
≥200―＜400
80
20
6
≥400―＜1000
160
40
13
≥1000―＜2000
400
100
32
≥2000
800
200
63
6.2**少培养皿数
在满足**少测点数的同时，还宜满足**少培养皿数，见下表
洁净度级别
所需Φ90mm培养皿数(以沉降0.5 h /静态或4h /动态计)
100
14
10000
2
100000
2
6.3采样点布置类型
6.4采样点的位置
6.4.1一般布置在离地面0.8-1.5m之间或操作平台的高度，除受洁净室（区）的设备限制外，应在整个洁净室（区）均匀布置。
6.4.2每个采样点一般采样一次，也可以多于1次。
6.4.3布置采样点时，应避开回风口，测试人员应在采样口的下风侧。
7、培养基制备
7.1依据检测区域的取样点数，按照《培养基配制标准操作规程》制备适量的营养琼脂培养基。
7.2在
超净工作台内，以无菌操作法将配制好的营养(nutrition)琼脂培养基以每皿约15ml的装量分装，待培养基凝固后移出洁净区。
7.3将制备的营养(nutrition)琼脂平皿倒置于生化培养箱内35℃培养48小时，确认无菌（fungus)落数后使用。
净化工作台用途：广泛适用于医药卫生、生物制药、食品、医学科学实验、光学、电子、无菌室实验、无菌微生物检验、植物组培接种等需要局部洁净无菌工作环境的科研和生产部门。也可连接成装配生产线具有低噪声、可移动性等优点。
7.4培养皿传进洁净室（区）测试前要进行表面消毒(disinfection)。
8、测试
8.1将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面(appearance)暴露在空气中。
8.2静态测试时，培养皿暴露时间为30min，动态测试时，培养皿暴露时间为不大于4h。
9、培养：取样结束后将平皿倒置于生化培养箱内35℃培养72小时，并以未采样的营养琼脂平皿作对照皿。
10、结果计算
10.1 用计数方法得出各个培养皿的菌落数。
10.1.1用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。
10.1.2 培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。
10.2 每个测点的沉降菌平均菌落数的计算:
=
式中： ---平均菌落数
M1---1号培养皿的菌落数
M2---2号培养皿的菌落数
Mn---n号培养皿的菌落数
n---培养皿的总数
11、结果评定
11.1 每个测点的沉降菌（fungus)的平均菌落数必须(have to)低于所规定评定标准的界限。
11.2 在静态测试时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合。
11.3若测试结果超标时应及时与生产部门联系，对该区域进行消毒或其它处理，然后重新测试**合格。
11.4洁净区沉降菌控制标准(biāo zhǔn)
洁净度级别
A
B
C
D
沉降菌cfu/4小时
标准
＜1
5
50
100
警戒限
--
3
40
80
纠偏限
--
4
45
90
1、表中数值均为平均值。
2、单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行检测(检查并测试)并积累计数。
12、注意的地方
12.1采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。
12.2应采取一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。
12.3测试用具要作灭菌（fungus)处理，以确保测试的可靠性、正确性。
净化工作台用途：广泛适用于医药卫生、生物制药、食品、医学科学实验、光学、电子、无菌室实验、无菌微生物检验、植物组培接种等需要局部洁净无菌工作环境的科研和生产部门。也可连接成装配生产线具有低噪声、可移动性等优点。
13、检测频率：1次/3个月。
14、附录
附录《沉降菌测试（TestMeasure)记录》
15、历史修订记录和原因
版本号
修订原因
修订日期
01
新订
附录
沉降菌测试记录
编码：SOP-ZL-HJ-006-01-R1
测试区域
测试依据
测试人员
测试日期
培养基用量
测试状态
培养时间
培养温度
报告日期
测试房间
房间编号
现场操作人员数
采样点布置类型
沉降菌菌落数/cfu
符合规定
a
b
测点1
测点2
测点3
测点4
更鞋间
PLES123
□ 否□
男一更
PLES124
□ 否□
女一更
PLES125
□ 否□
男二更
PLES126
□ 否□
女二更
PLES127
□ 否□
手消毒(disinfection)间
PLES128
□ 否□
外用酊剂线
PLES129
□ 否□
酊剂配制间
PLES130
□ 否□
酊剂灌装间
PLES131
□ 否□
预留间1
PLES132
□ 否□
溶液剂灌装间
PLES133
□ 否□
理瓶、洗瓶间
PLES138
□ 否□
瓶子暂存间
PLES139
□ 否□
洗衣整衣间
PLES140
□ 否□
消毒(disinfection)液配制间
PLES141
□ 否□
不合格品存放
PLES142
□ 否□
洁具存放间
PLES143
□ 否□
模具（称号：工业之母）存放间
PLES144
□ 否□
容器存放
PLES145
□ 否□
容器洗涤
PLES146
□ 否□
内包材存放间
PLES147
□ 否□
溶液剂配制间
PLES148
□ 否□
半固体配制间
PLES149
□ 否□
废弃间
PLES150
□ 否□
中检室
PLES151
□ 否□
中间站
PLES152
□ 否□
称量间、（前室）
PLES153
□ 否□
称量、配料间
PLES154
□ 否□
粉碎、过筛间
PLES155
□ 否□
半固体灌装间
PLES156
□ 否□
原辅料暂存间
PLES157
□ 否□
缓冲室
PLES158
□ 否□
走廊
□ 否□
阴性对照
□ 否□
洁净度级别
A
B
C
D
沉降菌
cfu/4小时
标准
＜1
5
50
100
警戒限
--
3
40
80
纠偏限
--
4
45
90
备注
沉降菌测试（TestMeasure)记录
编码：SOP-ZL-HJ-006-01-R1
测试区域
测试依据
测试人员
测试日期
培养基用量
测试（TestMeasure)状态
培养时间
培养温度
报告日期
测试房间
房间编号
现场操作控制人员(personnel)数
采样点布置类型
沉降菌菌落数/cfu
符合规定
a
b
测点1
测点2
测点3
测点4
一更
PLEZ120
□ 否□
二更1
PLEZ121
□ 否□
二更2
PLEZ122
□ 否□
缓冲间1
PLEZ123
□ 否□
缓冲间2
PLEZ124
□ 否□
微生物限度室
PLEZ125
□ 否□
净化操作台
PLEZ125
□ 否□
阳性对照室
PLEZ126
□ 否□
净化操作控制台
PLEZ126
□ 否□
阴性对照
□ 否□
洁净度级别
A
B
C
D
沉降菌
cfu/4小时
标准
＜1
5
50
100
警戒限
--
3
40
80
纠偏限
--
4
45
90
备注
沉降菌测试记录
编码：SOP-ZL-HJ-006-01-R1
测试区域
测试依据
测试人员
测试日期
培养基用量
测试状态
培养时间
培养温度（temperature)
报告日期
测试房间
房间编号
现场操作人员(personnel)数
采样点布置类型
沉降菌菌落数/cfu
符合规定
a
b
测点1
测点2
测点3
测点4
更衣
PLEQ003
□ 否□
缓冲间1
PLEQ004
□ 否□
取样间
PLEQ005
□ 否□
缓冲间2
PLEQ006
□ 否□
阴性对照
□ 否□
洁净度级别
A
B
C
D
沉降菌
cfu/4小时
标准
＜1
5
50
100
警戒限
--
3
40
80
纠偏限
--
4
45
90
备注
